Los pacientes Diabeticos han sido tratados con insulina
derivada de las células beta del páncreas de animales, pero debido a que
algunos pacientes desarrollaron anticuerpos a esta los científicos
desarrollaron insulina humana a partir del vector E.coli mediante la técnica
del ADN recombinante. Como primer paso se debe sintetizaron químicamente las cadenas de ADN
con las secuencias correspondientes a las cadenas de glicocola y fenilalanina,
siendo necesarias 63 nucleótidos para la primera y 90 para la segunda más un
triplete para señalar el fin de la traducción y se añadió a cada gen el
triplete correspondiente a la metionina.
Los genes sintéticos se insertan por separado en el gen bacteriano
responsable de la b-galactosidasa y presente en un plásmido, estos se introducen en E. coli donde se multiplican,
fabricando un ARNm que tradujo una proteína quimérica, en la que una parte de
la secuencia de la b-galactosidasa estaba unida por una metionina a la cadenas
de glicocola o de fenilalanima de la insulina. ninguna de las cadenas de
insulina contiene metionina, esto se aprovecho para separar las cadenas de la
insulina del resto de proteína quimérica rompiendola con bromuro de cianógeno
que destruye la metionina. Después de purificadas, las cadenas de unieron
mediante una reacción que forma puentes disulfuro.
Bibliografia:
- http://www.littletree.com.au/dna.htm
- http://www.iqb.es/d_mellitus/historia/historia07.htm
- http://med.unne.edu.ar/catedras/farmacologia/temas_farma/volumen2/cap25_insuli.pdf
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