sábado, 1 de junio de 2013

Sintesis de Insulina Recombinante

Los pacientes Diabeticos han sido tratados con insulina derivada de las células beta del páncreas de animales, pero debido a que algunos pacientes desarrollaron anticuerpos a esta los científicos desarrollaron insulina humana a partir del vector E.coli mediante la técnica del ADN recombinante. Como primer paso se debe  sintetizaron químicamente las cadenas de ADN con las secuencias correspondientes a las cadenas de glicocola y fenilalanina, siendo necesarias 63 nucleótidos para la primera y 90 para la segunda más un triplete para señalar el fin de la traducción y se añadió a cada gen el triplete correspondiente a la metionina.


Los genes sintéticos  se insertan por separado en el gen bacteriano responsable de la b-galactosidasa y presente en un plásmido, estos  se introducen en E. coli donde se multiplican, fabricando un ARNm que tradujo una proteína quimérica, en la que una parte de la secuencia de la b-galactosidasa estaba unida por una metionina a la cadenas de glicocola o de fenilalanima de la insulina. ninguna de las cadenas de insulina contiene metionina, esto se aprovecho para separar las cadenas de la insulina del resto de proteína quimérica rompiendola con bromuro de cianógeno que destruye la metionina. Después de purificadas, las cadenas de unieron mediante una reacción que forma puentes disulfuro.


Bibliografia:


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